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CENTRO DE INVESTIGACION DEL CANCER

Unidad de Microscopía

La Unidad de Microscopía del IBMCC facilita los siguientes servicios:

1) Microscopía confocal: dos microscopios confocales (Zeiss LSM510 y Leica SP5).
2) Imagen de célula viva y deconvolución. Sistema Delta-Vision: Microscopio de fluorescencia de alta precision Olympus IX71perfeccionado pr Applied Precision.
3) Imagen de célula viva: microscopio de fluorescencia Nikon Eclipse TE-2000 para célula viva con cabina de control de temperatura y CO2.
4) La unidad también se encarga del mantenimiento y cuidado de todos los microscopios del IBMCC (9 microscopios de fluorescencia, 10 microscopios invertidos para cultivo celular, 1 microinyector, 1 microscopio para citogenética y 1 microscopio
para histología).

El personal de la Unidad:
• Maneja el microscopio confocal, haciendo Z-Series, Timelapse,FRAP y FRET.
• Imparte tutoriales para el correcto uso de los microscopios y atienden y resuelven los problemas derivados del uso de los equipos.
• Ayuda a los usuarios con el uso de los diferentes softwares de captura y tratamiento de imagen: SoftWorx®, MetaMorph ®, Openlab®, AxioVision® , LSM Image Browser® y DPManager ®.
• Revisa, mensualmente, todos los microscopios. En esta revisión se incluye ajuste de fases, ajuste Köhler y limpieza de objetivos. También hace revisiones semanales de las salas de microscopía con reposición de material.
• Cambia y arregla lámparas de mercurio y halógenas.
• Escribe guías y tutoriales sobre el uso de equipos y programas en la web de la Unidad.
• Mantiene el Sistema de Calidad de la Unidad. Certificado ISO: ISO 9001:2008.
• Mantiene la política de Riesgos Laborales según la norma OSHAS 18001:2007.

Servicios
• Microscopía confocal para usuarios internos y externos al CIC-IBMCC. La Unidad ofrece servicio a usuarios internos y externos. El Servicio informático permite la comunicación remota con la Unidad de microscopía para reservar el uso de los diferentes equipos, especialmente los confocales y el sistema de estudios de célula viva, Delta-Vision.
• Entrenamiento y consejo en el uso de programas de captura de imágenes. Enseñanza y consejo para el uso de programas de captura de imágenes que incluye entrenamiento básico y resolución de dudas acerca de los programas de captura, análisis y procesamiento de imagen (Metamorph®, Leica LAS AF®, Image Browser LSM® y OpenLab®).
• Creación, actualización y mantenimiento de la Web de la Unidad. Mantenimiento de la Web de la Unidad que incluye la constante actualización de especificaciones técnicas para los nuevos equipos que se incorporen al centro, así como sus tutoriales y guías. Uso básico de hardware y software asociado a los microscopios.
• Consejo y entrenamiento para el uso de equipos de célula viva (Nikon Eclipse TE2000). Consejo y entrenamiento para el uso de equipos de célula viva (Nikon Eclipse TE2000) con sistema de control de la temperatura y CO2, que incluye entrenamiento básico en el manejo del equipo y de su software (Metamorph®), montaje y diseño de experimentos Timelapse y procesamiento de las imágenes para hacer videos.
• Desarrollo de tutoriales. Desarrollo de tutoriales con instrucciones para el uso de los programas de análisis de imágenes que facilitan el uso de los microscopios y de la captura y análisis de las imágenes en los programas asociados.
• Revisión y mantenimiento mensual de los equipos de microscopía. Revisión y mantenimiento mensual de los equipos de microscopía del Centro, incluyendo ajuste de fases en los microscopios de los cuartos de cultivo y ajuste Köhler en los microscopios de fluorescencia. Control, reposición y ajuste de lámparas de fluorescencia de los microscopios.

Equipamiento
La unidad de microscopía del Centro de Investigación del Cáncer está dotada con una gran cantidad de equipos muy diferentes entre sí, que ofertan un amplio abanico de posibilidades de estudios y análisis a los usuarios. Cabe destacar cuatro equipos principales, por su coste económico y por el servicio que prestan.
• Microscopio Confocal Leica SP5. Este equipo cofinanciado por los fondos F.E.D.E.R., el ministerio de Sanidad y Consumo y el Instituto de Salud Carlos III, es el equipo principal de la unidad ya que aproximadamente el 80% del trabajo de la unidad.
Este equipo cuenta con cuatro láseres que ofertan siete líneas de excitación para fluorocromos, que, combinado con la tecnología de detección espectral con el que está configurado, permite la observación de todos los fluorocromos disponibles en el rango del espectro visible. Gracias a su módulo confocal es muy demandado por los usuarios para la obtención de imágenes a partir de sus modelos de estudio (cultivos celulares, tejidos, etc.) con alta resolución y nitidez. Además, gracias a su platina motorizada y al potente software informático que lo controla, permite la realización de aplicaciones más complejas como reconstrucciones 3D, FRAP, FRET, análisis de colocaclización.
• Microscopio para estudios in vivo Delta-Vision. Este equipo fue adquirido gracias a la financiación de los fondos FEDER y el CSIC y está especialmente indicado para la realización de experimentos tipo time-lapse con modelos de estudio vivos. Su principal aplicación es para los organismos eucariotas con pared celular, las levaduras, debido a la dificultad que entraña el trabajo con este modelo. Aún así, su uso se dedica a la obtención de imágenes de gran calidad de otros tipos de ensayos a partir ce células animales, en cultivo, fijadas, en tejido... La principal ventaja de este equipo reside en su platina ultra precisa, su sistema de iluminación que combina un lámpara de xenon y una rueda externa de filtros de excitación y una cámara tipo CCD de gran sensibilidad. Gracias a estos componentes, este microscopio captura imágenes a una gran velocidad y con poco tiempo de exposición, lo cual permite una mayor supervivencia de los modelos de estudio in vivo. Un gran avance que aporta este microscopio a la unidad es el módulo de deconvolución, un algoritmo informático que hace un tratamiento de las imágenes consiguiendo imágenes de una gran calidad.
• Microscopio Confocal Zeiss LSM 510. Se trata de un equipo más antiguo cuya demanda de uso ha disminuido drásticamente desde la incorporación a la unidad del microscopio confocal Leica SP5, pero está perfectamente funcional. Su uso está indicado para cuando hay una gran demanda de uso para la obtención de imágenes y sobre todo para dar servicio a los usuarios externos al CICIBMCC que así lo soliciten.
• Microscopio para estudios in vivo Nikon Eclipse TE 2000. Se utiliza fundamentalmente para la obtención de vídeos que representen procesos biológicos en muestras vivas. Además está asociado al programa Metamorph®, que es un software muy útil en microscopía por sus innumerables aplicaciones para el tratamiento de imágenes, medidas y diferentes análisis. Además de estos equipos la infraestructura de la unidad de microscopía del CIC-IBMCC se completa con varios equipos de fluorescencia, microscopios de cultivo para la observación de los cultivos celulares y equipos para diferentes análisis como histológicos o FISH.

Coordinador Científico

Alberto Martín Pendas
Tel.: 923 294809
E-mail: amp@usal.es

Dirección y contacto

Ana Isabel García Vega, Angel Luis Prieto Martín
Centro de Investigación del Cáncer
(CSIC-Universidad de Salamanca)
Avda. Universidad de Coimbra s/n
Campus Universitario Miguel de Unamuno
E- 37007 Salamanca (ESPAÑA)
Tel.: 923 492 720 / Ext: 3016. Móvil: 663172549

E-mail: microscopia_cic@usal.es